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大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒
規(guī)格：96T/48T
用途：用于檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等樣本中大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)的濃度。
使用前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)。如果有任何問(wèn)題，請(qǐng)聯(lián)系我們。
具體保質(zhì)期請(qǐng)見(jiàn)試劑盒外包裝標(biāo)簽。請(qǐng)?jiān)诒Ｙ|(zhì)期內(nèi)使用試劑盒。聯(lián)系時(shí)請(qǐng)?zhí)峁┊a(chǎn)品貨號(hào)、生產(chǎn)日期（見(jiàn)盒簽），以便我們更高效為您服務(wù)。
【試劑盒性能】
物理性能：各液體組分澄清透明、無(wú)沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝，無(wú)破損漏氣。
校準(zhǔn)曲線(xiàn)線(xiàn)性：校準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線(xiàn)相關(guān)系數(shù) r 值，大于等于 0.9900。
精密度：批內(nèi)變異系數(shù) CV%小于 10%；批間變異系數(shù) CV%小于 15%。
回收率：回收率在 85%-115%之間。
敏感性：本試劑盒識(shí)別大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)，與結(jié)構(gòu)類(lèi)似物無(wú)交叉。
穩(wěn)定性：2℃-8℃保存，有效期 6 個(gè)月。
【實(shí)驗(yàn)原理】
大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中指標(biāo)表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中指標(biāo)相結(jié)合，經(jīng)過(guò)徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值）與待測(cè)樣品中大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)的濃度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線(xiàn)，可以計(jì)算出樣本中大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)的濃度。
【試劑盒組成】
注意：
1、使用前請(qǐng)檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致。
2、試劑盒 2-8℃保存，不得使用過(guò)期試劑盒。
3、包被微孔板單次未使用完，要謹(jǐn)記密封放到 2-8℃保存。
4、如果試劑盒的組份需要再次使用，請(qǐng)確保上一次使用之后沒(méi)有被污染。
【樣品的準(zhǔn)備和保存】
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過(guò)程中， 不得使用疊氮鈉做為防腐劑。樣品如果不立即分析，應(yīng)分裝后冷凍保存， 且避免反復(fù)凍融。
細(xì)胞培養(yǎng)上清：離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血清：用干凈試管收集血液，室溫凝固 30 分鐘，離心 2000×g 20 分鐘，收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血漿：采用肝素、檸檬酸鹽或 EDTA 抗凝，抽血后 30 分鐘內(nèi)在2-8℃離心 2000×g 20 分鐘。為消除血小板的影響，建議在 2-8℃進(jìn)一步離心 10000×g 10 分鐘。立即分析或分后-20℃冷凍保存。
細(xì)胞裂解液：對(duì)于貼壁細(xì)胞，去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用移液器吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常 10 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。對(duì)于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用移液器吹打把細(xì)胞吹散，用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后，10000—14000×g 離心 3-5 分鐘， 取上清。立即分析或分裝后-20℃ 冷凍保存。
尿液：用無(wú)菌管收集，離心 2000×g 20 分鐘。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
【注意事項(xiàng)】
1、本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷。
2、試驗(yàn)中請(qǐng)穿著實(shí)驗(yàn)服并戴乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液樣品時(shí)，請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條例執(zhí)行。
3、嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
4、洗板不正確可能導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。
5、消除板底殘留的液體和手指印，否則影響 OD 值。
6、底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色。
7、避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。
8、在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。
9、平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
10、任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
11、檢測(cè)使用的酶標(biāo)儀需要安裝能檢測(cè) 450±10nm 波長(zhǎng)的濾光片，
光密度范圍在 0-3.5 之間。建議使用時(shí)提前 15 分鐘預(yù)熱。
12、請(qǐng)勿使用其他批號(hào)或其他來(lái)源的試劑混合或替代本試劑盒中的試劑。
13、試驗(yàn)中所用的 EP 管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁混用。
14、請(qǐng)勿使用過(guò)期的試劑。
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