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人細胞間粘附分子2（ICAM-2）ELISA檢測試劑盒說明書
人緊密連接蛋白1(ZO1)檢測試劑盒
規(guī)格：96T/48T
用途：用于檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液等樣本中人緊密連接蛋白1(ZO1)的濃度。
使用前請仔細閱讀說明書。如果有任何問題，請聯(lián)系我們
具體保質(zhì)期請見試劑盒外包裝標簽。請在保質(zhì)期內(nèi)使用試劑盒。聯(lián)系時請?zhí)峁┊a(chǎn)品貨號、生產(chǎn)日期（見盒簽），以便我們更高效為您服務(wù)。
【試劑盒性能】
物理性能：各液體組分澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝，無破損漏氣。
校準曲線線性：校準品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù) r 值，大于等于 0.9900。精密度：批內(nèi)變異系數(shù) CV%小于 10%；批間變異系數(shù) CV%小于 15%。
回收率：回收率在 85%-115%之間。
敏感性：本試劑盒識別人緊密連接蛋白1(ZO1)，與結(jié)構(gòu)類似物無交叉。
穩(wěn)定性：2℃-8℃保存，有效期 6 個月。
【實驗原理】
人緊密連接蛋白1(ZO1)檢測試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測定標本中指標表達。用純化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可與樣品中指標相結(jié)合，經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）與待測樣品中人緊密連接蛋白1(ZO1)的濃度呈正相關(guān)。擬合校準品曲線，可以計算出樣本中人緊密連接蛋白1(ZO1)的濃度。
【試劑盒組成】
注意：
1、使用前請檢查試劑盒中試劑的標簽和數(shù)量與表格是否一致。
2、試劑盒 2-8℃保存，不得使用過期試劑盒。
3、包被微孔板單次未使用完，要謹記密封放到 2-8℃保存。
4、如果試劑盒的組份需要再次使用，請確保上一次使用之后沒有被污染。
【樣品的準備和保存】
以下只是列出樣品采集和保存的一般指南。所有樣本采集保存過程中， 不得使用疊氮鈉做為防腐劑。樣品如果不立即分析，應(yīng)分裝后冷凍保存， 且避免反復(fù)凍融。
細胞培養(yǎng)上清：離心去除沉淀，立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血清：用干凈試管收集血液，室溫凝固 30 分鐘，離心 2000×g 20 分鐘，收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
血漿：采用肝素、檸檬酸鹽或 EDTA 抗凝，抽血后 30 分鐘內(nèi)在2-8℃離心 2000×g 20 分鐘。為消除血小板的影響，建議在 2-8℃進一步離心 10000×g 10 分鐘。立即分析或分后-20℃冷凍保存。
細胞裂解液：對于貼壁細胞，去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用移液器吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。通常 10 秒后，細胞就會被裂解。對于懸浮細胞，離心收集細胞，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液，用移液器吹打把細胞吹散，用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后，10000—14000×g 離心 3-5 分鐘， 取上清。立即分析或分裝后-20℃ 冷凍保存。
尿液：用無菌管收集，離心 2000×g 20 分鐘。仔細收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
【注意事項】
1、本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷。
2、試驗中請穿著實驗服并戴乳膠手套做好防護工作。特別是檢測血液或者其他體液樣品時，請按國家生物試驗室安全防護條例執(zhí)行。
3、嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫 20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
4、洗板不正確可能導(dǎo)致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
5、消除板底殘留的液體和手指印，否則影響 OD 值。
6、底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色。
7、避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
8、在儲存和溫育時避免強光直接照射。
9、平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
10、任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
11、檢測使用的酶標儀需要安裝能檢測 450±10nm 波長的濾光片，
光密度范圍在 0-3.5 之間。建議使用時提前 15 分鐘預(yù)熱。
12、請勿使用其他批號或其他來源的試劑混合或替代本試劑盒中的試劑。
13、試驗中所用的 EP 管和吸頭均為一次性使用，嚴禁混用。
14、請勿使用過期的試劑。
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02162457717
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